欧美精品久久久久久A片戏梦巴黎,日韩a片,中文人妻熟女乱又乱精品,玉蒲团之玉女心经

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

RNA酶實驗避免污染問題注意事項
點擊次數(shù):43 更新時間:2024-12-31

RNase酶非常穩(wěn)定,是導(dǎo)致RNA降解最主要的物質(zhì)。它在一些ji端的條件可以暫時失活,但限制因素去除后又迅速復(fù)性。用常規(guī)的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑不能使所有的RNase完wan全失活。為了獲得高質(zhì)量的真核細(xì)胞mRNA,必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細(xì)胞和滅活RNA酶同步進(jìn)行的方法,最大限度地降低細(xì)胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時,避免偶然引入實驗室內(nèi)其他潛在的痕量RNA酶也很重要。下面列舉避免RNA酶污染問題的一些注意事項。大多數(shù)有經(jīng)驗的研究者并不拘泥于這些注意事項,只是在遇到問題時可能采用其中的一種或幾種方法加以解決。我們謹(jǐn)將下述內(nèi)容作為解決RNA酶污染問題的實驗指南。

1.塑料制品:盡可能使用無菌、一次性塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒有開封使用過,通常沒有必要再次處理。對于國產(chǎn)塑料制品,有些廠家提供的產(chǎn)品已達(dá)到RNase-free,可以直接使用,再次處理容易造成二次污染,得不償失。但原則上國產(chǎn)塑料制品處理后方可使用。處理方法如下:

(1)在玻璃燒杯中注入去離子水,加入焦碳酸2乙酯(DEPC)使DEPC的終濃度為0.1%。注意:DEPC有致癌之嫌,須在通風(fēng)柜中小心操作。

(2)將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC水溶液,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。

(3)在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜。

(4)將EDPC水溶液小心倒入廢液瓶中,用鋁箔封住含DEPC水處理過的塑料制品的燒杯,高溫高壓蒸氣滅菌至少30分鐘。上述處理可以除去器皿上痕量的DEPC,以防DEPC通過羧甲基化作用對RNA的嘌呤堿基進(jìn)行修飾。

(5)用合適的溫度(80-90℃)烘烤至干燥,置于干凈處備用。

2.玻璃和金屬制品:實驗室用的普通玻璃和金屬器皿經(jīng)常有RNA酶污染,使用前必須于180℃干烤8小時或250℃烘烤3小時以上。另一種方法是用0.1%的DEPC水溶液浸泡。

3.電泳槽:用于RNA電泳的電泳槽應(yīng)用去污劑洗干凈,再用水沖洗,用乙醇干燥,然后灌滿3%的H2O2溶液,于室溫放置10分鐘,然后用0.1%DEPC處理過的水徹di底沖洗電泳槽。最好能留出一些玻璃器皿,塑料制品和電泳槽作上特殊標(biāo)記,存放在指zhi定地點,為RNA實驗專用。

4.移液器:RNase的又一污染源是移液器。根據(jù)移液器制造商的要求對移液器進(jìn)行處理。一般情況下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗移液器的內(nèi)部和外部,基本達(dá)到要求。移液器金屬退頭器是RNA酶的一個重要來源,實驗前最好取下它。

5.溶液:用高壓滅菌的水和RNA研究專用的化學(xué)試劑配制溶液,用干烤過的藥匙稱取試劑,將溶液裝入無RNA酶的玻璃器皿??赡艿脑捜芤簯?yīng)用0.1%DEPC水于37℃至少處理12小時,然后于100℃加熱15分鐘或在15 lbf/in2(1.034×105Pa)的高壓下蒸氣滅菌30分鐘。注:DEPC可與胺類迅速發(fā)生化學(xué)反應(yīng),因此不能用來處理含有Tris一類的緩沖液,可存幾瓶新的,未開封的Tris晶體以制備無RNA酶的溶液。

6.研究人員:RNA酶廣泛存在于人的皮膚上,最主要的潛在污染源是研究人員的手。因此,在準(zhǔn)備分離和分析RNA的材料和溶液時,以及在涉及RNA的一切操作過程中,都應(yīng)戴一次性手套,接觸“臟的"玻璃器皿和其他物品以后,手套就可能沾染上RNA酶,因此進(jìn)行RNA實驗時應(yīng)勤換手套。

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 版權(quán)所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機(jī):13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:www.kefangjiaju.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標(biāo)準(zhǔn)品/化學(xué)試劑
點擊這里給我發(fā)消息
手機(jī):13310162040
锵锵锵锵锵锵锵好大好深| 把女人弄爽特黄a大片视频| 成年免费A级毛片免费看无码 | 欲色av无码一区二区人妻| 真人无遮挡猛进猛出视频| 娇小w搡bbbb搡bbb| 日本无翼乌邪恶彩色大全| 男男调教后菊撑开扩张a片| 男男浴室吸乳play| 国产猛男猛女超爽免费视频| 欧美大片免费播放器| 白嫩少妇激情无码| 极品少妇xxxx精品少妇偷拍| 被黑人猛烈进出到抽搐动态图| 中文字幕爆乳巨爆乳系列| 精品国产乱码久久久人妻| 再深点灬舒服灬受不了了视频| 久久久久久久| 门卫老李干了校花高小柔| 两根一起进去好紧好涨| 亚洲熟妇色自偷自拍另类| 在厨房拨开内裤进入毛片| 久久久性色精品国产免费观看| 美国式禁忌3| jrs直播(无插件)直播| 88蜜桃人妻无码精品系列| 免费播放男人添女人下边| 久久久精品| 他底下好硬蹭着我想要| 天天躁日日躁狠狠躁午夜剧场| 真人高清实拍女处被破的视频| 真人性做爰无遮a片免费| 天堂中文在线资源库| 国产成人无码一区二区三区在线| 97超级碰碰碰免费公开在线观看| 国产精品久久久久久人妻| 白嫩娇妻被交换经过| gogo全球高清大胆国模| 两个人免费完整版在线观看视频| 国产日产欧产美韩系列| 欲求不満の人妻松下纱荣子|